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免疫組織化學(xué)(IHC)實(shí)驗(yàn)樣本制備步驟詳解

發(fā)布時(shí)間:2024-03-20 16:27分享:
免疫組織化學(xué)(Immunohistochemistry,IHC)是利用抗原與抗體特異性結(jié)合的原理,通過(guò)化學(xué)反應(yīng)使標(biāo)記抗體的顯色劑(熒光素、酶、金屬離子、同位素)顯色來(lái)確定組織細(xì)胞內(nèi)抗原(多肽和蛋白質(zhì))。

固定


1. 組織取材后,要立即放入固定液中進(jìn)行固定,以防止組織自溶與腐敗。

2. 常用的固定液有10%的甲醛(福爾馬林)、酒精、醋酸酒精等。

3. 本實(shí)驗(yàn)采用10%的中性福爾馬林固定液,將組織塊放入其中進(jìn)行固定。

4. 固定液的量應(yīng)為組織體積的5~10倍,固定時(shí)間一般在18~24h,以使組織充分固定。


包埋


1. 脫水后的組織需要進(jìn)行包埋,以使其能夠耐受切片過(guò)程中的機(jī)械作用力。

2. 常用的包埋劑有石蠟、樹(shù)脂等。本實(shí)驗(yàn)采用石蠟作為包埋劑。

3. 將脫水后的組織取出,放入熔化的石蠟中進(jìn)行包埋。



脫蠟


1.將載玻片上的切片置于脫蠟劑中,以去除蠟塊并使切片恢復(fù)水合狀態(tài)。

2.脫蠟過(guò)程通常涉及將載玻片在不同濃度的酒精中逐漸脫蠟,然后在水中進(jìn)行最后的水合。



組織包埋機(jī)

       主要用于動(dòng)植物標(biāo)本經(jīng)脫水浸蠟后進(jìn)行組織蠟塊包埋,以供切片后作組織學(xué)診斷或研究。本產(chǎn)品由主機(jī)+冷臺(tái)+熱臺(tái)三部分組成,具有5個(gè)溫控系統(tǒng),其中蠟缸、蠟嘴、工作臺(tái)、保存缸和儲(chǔ)鑷塊溫度控制在室溫-99℃范圍內(nèi)任意可調(diào),冷臺(tái)溫度可控,容積6L,一次可滿足400個(gè)組織同時(shí)包埋。


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