Flow cytomix實(shí)驗(yàn)之前注意事項(xiàng)

1、混和：

在準(zhǔn)備珠子混和物的時(shí)候，吸出的珠子直接加到管子的底部，以免珠子留在管壁有損失。

混和標(biāo)準(zhǔn)品或樣品的時(shí)候馬上渦旋珠子，在把試管放到流式細(xì)胞儀之前每個(gè)樣品再次渦旋3-5秒，這樣可以更好的在FL3/FL4通道區(qū)分珠子的種類。

2、避免雙倍的珠子數(shù)目：

在把珠子的溶液加到測(cè)定板上的時(shí)候，把珠子加到孔中的標(biāo)準(zhǔn)品或樣品的溶液中，確保不要粘附到孔的邊上。

3、堵塞過濾板：

血清或血漿樣品在洗滌過程中可能堵塞過濾板，如果發(fā)生這種情況，小心的推動(dòng)通過板孔的針。

同一樣品Flow cytomix與ELISA所得結(jié)果不同

熒光報(bào)告系統(tǒng)比ELISA具有更多的優(yōu)勢(shì)，比如動(dòng)態(tài)范圍更大。由于復(fù)雜性和珠為基礎(chǔ)的動(dòng)力學(xué)分析，用ELISA所得的定量結(jié)果可能與Flow cytomix 所得的不同。因此，只與所得值正相關(guān)，而不是比較ELISA和Flow cytomix的絕對(duì)值。

什么是血清血漿的能夠檢測(cè)到的可靠的最低值

血清或血漿中的細(xì)胞因子經(jīng)常會(huì)低于常規(guī)免疫檢測(cè)的水平，這是由于大多數(shù)細(xì)胞因子僅僅在自身周圍具有較高的免疫活性，而且多數(shù)情況下，具有半衰期。因此，可以合理的假定，僅僅在出現(xiàn)病理變化的時(shí)候細(xì)胞因子才會(huì)在全身的血清和血漿中檢測(cè)出較高的數(shù)量。對(duì)于趨化因子和生長因子可能產(chǎn)生較高的水平和較長的半衰期，因此更容易被檢到。

標(biāo)準(zhǔn)品注意事項(xiàng)

1、標(biāo)準(zhǔn)品的準(zhǔn)備：在開始之前離心標(biāo)準(zhǔn)品管；

2、標(biāo)準(zhǔn)品的建立：不要用稀釋12個(gè)小時(shí)后的標(biāo)準(zhǔn)品，每個(gè)實(shí)驗(yàn)都要用新鮮的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋品；

3、嚴(yán)格按照說明書操作，微珠的量不精確會(huì)影響實(shí)驗(yàn)的敏感性；

4、FlowCytomix是用PE熒光標(biāo)記的，在加入指示試劑之后所有步驟都要避光，以獲得最大熒光信號(hào)。