1.    AAV2Retro 非跨突觸逆標(biāo)

血清型2Retro是在2型血清型的基礎(chǔ)上突變篩選得到的，最主要的是在原來(lái)外殼上的肝素結(jié)合位點(diǎn)中間添加了大約7個(gè)氨基酸，它比AAV2型的病毒逆標(biāo)的能力提高了100多倍。

優(yōu)點(diǎn)：在大部分環(huán)路逆標(biāo)效率高，能夠在上游直接表達(dá)目的基因。

缺點(diǎn)：不過有些環(huán)路它的標(biāo)記能力有限，在一些上游表達(dá)的不均勻，跟CAV一樣它對(duì)上游的感染不是通過突觸傳遞實(shí)現(xiàn)的，而是對(duì)上游細(xì)胞的直接感染，可能會(huì)造成一些非特異的感染。

實(shí)驗(yàn)方案1：

在下游注射AAV2Retro-Cre（滴度1E+13VG/mL，體積20~50nl左右），上游注射DIO-GOI病毒（一般用血清型9型，滴度3E+12VG/mL，體積200nl左右）

實(shí)驗(yàn)方案2：

在下游注射AAV2Retro-GOI（滴度1E+13VG/mL，體積20~50nl左右），在上游直接觀察；

實(shí)驗(yàn)方案3：

在下游注射AAV2Retro-DIO-GOI（滴度1E+13VG/mL，體積20~50nl左右），上游注射Cre病毒（一般用血清型9型，滴度3E+12VG/mL，體積200nl左右）或者是上游有Cre表達(dá)的轉(zhuǎn)基因鼠。

2.    AAV2Retro Plus非跨突觸逆標(biāo)（泰兒圖獨(dú)有）

血清型2Retro Plus是在2Retro型血清型的基礎(chǔ)上增加了多個(gè)點(diǎn)突變，提高了病毒在運(yùn)輸過程中的穩(wěn)定性。

優(yōu)點(diǎn)：逆標(biāo)的效率比2Retro更高，表達(dá)更均勻。

缺點(diǎn)：跟CAV一樣它對(duì)上游的感染不是通過突觸傳遞實(shí)現(xiàn)的，而是對(duì)上游細(xì)胞的直接感染，可能會(huì)造成一些非特異的感染。

實(shí)驗(yàn)方案1：

在下游注射AAV2Retro Plus-Cre（滴度1E+13VG/mL，體積20~50nl左右），上游注射DIO-GOI病毒（一般用血清型9型，滴度3E+12VG/mL，體積200nl左右）

實(shí)驗(yàn)方案2：

在下游注射AAV2Retro Plus -GOI（滴度1E+13VG/mL，體積20~50nl左右），在上游直接觀察；

實(shí)驗(yàn)方案3：

在下游注射AAV2Retro Plus -DIO-GOI（滴度1E+13VG/mL，體積20~50nl左右），上游注射Cre病毒（一般用血清型9型，滴度3E+12VG/mL，體積200nl左右）或者是上游有Cre表達(dá)的轉(zhuǎn)基因鼠。

3.    CAV非跨突觸逆標(biāo)

Canine-Adeno-Virus能夠從纖維和胞體進(jìn)入神經(jīng)元細(xì)胞，它對(duì)神經(jīng)元細(xì)胞的親嗜性遠(yuǎn)高與膠質(zhì)細(xì)胞。當(dāng)CAV從纖維或末梢進(jìn)入神經(jīng)元細(xì)胞之后，有一部分病毒會(huì)被細(xì)胞轉(zhuǎn)運(yùn)到胞體中，繼而表達(dá)CAV載體所攜帶的外源基因。

優(yōu)點(diǎn)：CAV病毒對(duì)細(xì)胞基本沒有毒性，顆粒大，擴(kuò)散小，感染區(qū)域可控。適合做稀釋標(biāo)記。

缺點(diǎn)：目前用的重組CAV病毒在上游的表達(dá)能力較弱，其次在有些環(huán)路它的標(biāo)記能力有限，還有它的對(duì)上游的感染不是通過突觸傳遞實(shí)現(xiàn)的，而是對(duì)上游細(xì)胞的直接感染，可能會(huì)造成一些非特異的感染。

實(shí)驗(yàn)方案：

在下游注射CAV-Cre（滴度1E+12VP/mL，體積200nl左右），上游注射DIO-GOI病毒（一般用血清型9型，滴度3E+12VG/mL，體積200nl左右）

4.    WGA-Cre表達(dá)載體

wheat-germ agglutinin 小麥凝集素蛋白，在神經(jīng)元中表達(dá)后有跨突觸的能力。偶聯(lián)Cre蛋白的WGA，會(huì)攜帶Cre同時(shí)跨突觸從而標(biāo)記上下游神經(jīng)元。

優(yōu)點(diǎn)：可實(shí)現(xiàn)細(xì)胞特異上下游標(biāo)記（比如用fDIO-WGA-Cre）。

缺點(diǎn)：在一些環(huán)路中效果不佳，上下游均有可能標(biāo)記。

實(shí)驗(yàn)方案：

在下游注射WGA-Cre（滴度3E+12VG/mL，體積200nl左右），上游注射DIO-GOI病毒（一般用血清型9型，滴度3E+12VG/mL，體積200nl左右）