腺相關(guān)病毒載體概述

病毒基因產(chǎn)物（例如：E2A,E4和VA RNA 基因）大部分由與其他質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染進(jìn)細(xì)胞的pHelper質(zhì)粒提供，其余的腺病毒基因產(chǎn)物由穩(wěn)定表達(dá)腺病毒E1基因的AAV-293宿主細(xì)胞提供。AAV-293細(xì)胞是經(jīng)過改良HEK293腺相關(guān)病毒生產(chǎn)能力而衍生出的亞克隆細(xì)胞系。由于不再需要活的輔助病毒，AAV Helper-Free System提供一個(gè)更安全，更便利的替代逆轉(zhuǎn)錄病毒和腺病毒的基因傳遞系統(tǒng)。

腺相關(guān)病毒用于基因傳遞和表達(dá)的優(yōu)勢(shì)

1) 宿主細(xì)胞范圍廣

腺相關(guān)病毒可以感染廣泛的哺乳動(dòng)物細(xì)胞并且以成功應(yīng)用于人源和非人源蛋白的表達(dá)，宿主細(xì)胞活躍的分裂不是感染的必要條件，重組腺相關(guān)病毒能感染分裂期和非分裂期細(xì)胞。

2) 長(zhǎng)期的基因表達(dá)能力

重組AAV能保存于人類宿主細(xì)胞中，保持長(zhǎng)期的基因轉(zhuǎn)錄表達(dá)能力，對(duì)于終末分化的細(xì)胞這個(gè)優(yōu)點(diǎn)特別明顯。

3) 低免疫原性

與已獲得臨床應(yīng)用的腺病毒載體相比，AAV在注射后引起的免疫反應(yīng)是微弱并且短暫的。

4) 良好的擴(kuò)散性能

AAV的病毒粒徑只有腺病毒的1/5，慢病毒的1/4，體積上相差數(shù)十倍到100倍，所以AAV的擴(kuò)散性遠(yuǎn)高于這兩種病毒。

5) 較高的生物安全級(jí)別

AAV是天然缺陷型病毒（生產(chǎn)性感染依賴于幾個(gè)額外的反式因子），并且目前還沒有發(fā)現(xiàn)它和任何的人類疾病有關(guān)聯(lián)。在AAV Helper-Free System中，AAV反向重復(fù)（ITR）序列和rep/cap基因分別位于缺少共同序列的單獨(dú)的質(zhì)粒上，以阻止生產(chǎn)出重組野生型病毒。這樣特征賦予了作為病毒來源的基因傳遞和表達(dá)系統(tǒng)的AAV Helper-Free System一個(gè)較高的生物安全級(jí)別。

不同血清型AAV載體在不同器官的感染情況

金標(biāo)腺相關(guān)病毒載體應(yīng)用案例