CaspGlow 實驗參考方案
發(fā)布時間:2019-08-23 10:47分享:
以CaspGLOW? Fluorescein Active Caspase-3 Staining Kit(88-7004)為例。
1.根據(jù)文獻中方法誘導(dǎo)靶細(xì)胞凋亡,準(zhǔn)備未誘導(dǎo)細(xì)胞作為陰性對照,另外一種陰性對照用1ul Z-VAD-FMK 抑制劑制備。
2.將細(xì)胞加入300ul完全培養(yǎng)基中,濃度為1×106.
3.加1ul FITC-DEVD-FMK 在5%CO2 37攝氏度下孵育30~60min.
4.3000rpm,5min,移去上清。
5.加入0.5ml wash-buffer 洗滌細(xì)胞一次。
6.重復(fù)步驟4和步驟5.7.流式細(xì)胞儀分析,如果需要延后分析,請置于冰上避光保存。
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