試劑準(zhǔn)備:

流式染色緩沖液 (Flow Cytometry Staining Buffer) :產(chǎn)品編號(hào)TNB-4222-L500

12x75 mm 圓底流式管或 96孔圓底微孔板

染色流程:

1. 制備單細(xì)胞懸浮液，用流式染色緩沖液調(diào)整濃度至2 x 10 7- 2  x 10 8 cells/mL。

2. 每管（或孔）加50 μL 細(xì)胞懸浮液。

3. 加推薦量的抗體到樣品里，細(xì)胞懸浮液+抗體的最終體積不應(yīng)超過(guò)100μL。

4. 4°C避光孵育20-60分鐘。

5. 用200-300 μL (微孔板) 或 12 mL (管) 染色緩沖液洗細(xì)胞.

6. 300-400 x g室溫離心5分鐘，棄掉上清液。短暫渦旋重懸細(xì)胞。

7. 如果不需要加二抗，直接調(diào)到第10步 。

8. 如果二抗是純化抗體或生物素偶聯(lián)抗體，加100 μL 稀釋好的抗體到管里。

9. 4°C避光孵育20-60分鐘。

10. 300-400 x g室溫離心5f分鐘，棄掉上清液。短暫渦旋重懸細(xì)胞。

11. 每管加入適當(dāng)?shù)娜旧彌_液重懸細(xì)胞，上機(jī)檢測(cè)或進(jìn)行胞內(nèi)染色。