m6A MeRIP 試劑盒
產(chǎn)品簡介
m6A修飾是哺乳動物中最豐富的RNA表觀修飾,同時(shí)也是第一個(gè)研究相對清楚的RNA表觀修飾,其將表觀遺傳學(xué)的研究從基因組層面(DNA和組蛋白的修飾)推向到RNA層面,是生物學(xué)中的一個(gè)重要研究前沿和研究熱點(diǎn)。
m6A MeRIP分析試劑盒使用RNA甲基化免疫沉淀的方法來識別廣闊轉(zhuǎn)錄組中的m6A。在RNA甲基化免疫沉淀分析中,采用化學(xué)的方法使RNA片段化到100左右的核苷酸或更小的片段采用單克隆抗體使得有吸附力的磁珠用免疫沉淀反應(yīng)將其指向m6A。在免疫沉淀反應(yīng)之后,分離的 RNA片段采用qRT-PCR或RNA-測序(RNA-seq)來進(jìn)行檢測。
產(chǎn)品特點(diǎn)
此品非常適合從各種細(xì)胞、組織、哺乳動物、真菌、細(xì)菌、植物、血漿和血清等樣本中提取的總RNA和polyA富集的RNA,進(jìn)行特定基因RNA甲基化水平的定量分析。主要檢測儀器:實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀或測序儀。
注意事項(xiàng)
1.所有的耗材須用無RNA酶的耗材。本試劑盒的試劑均進(jìn)行過去RNA酶處理。
2.所有操作盡量在冰上進(jìn)行,以減少RNA的降解。
3.MeRIP對RNA損失較大,最后洗脫的RNA盡量用低濃度RNA提取試劑提取。
4.本試劑盒片段化時(shí)間為3min,片段化的RNA大小約為200-300nt (滿足大部分實(shí)驗(yàn)要求) 。需要更小片段的RNA,可以將時(shí)間延長,最長不超過5min。
5.本試劑盒經(jīng)優(yōu)化可以進(jìn)行低至1ug總RNA 進(jìn)行MeRIP,但是如果目標(biāo)RNA豐度較低,建議提高總的RNA用量。
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