關(guān)于血清的那些事兒（一）：血清中的沉淀
與細(xì)胞為伴的你，
是否為血清中的沉淀所困擾？
血清中的沉淀是什么？
哪些操作導(dǎo)致沉淀增多？
沉淀該如何去除？
血清究竟該如何存儲(chǔ)，如何解凍？
你想要的都在這里！
血清是血液凝固析出的淡黃色透明液體，是血漿去除纖維蛋白后的混合物，主要成分包括蛋白質(zhì)、氨基酸、糖類(lèi)、維生素和多肽（如生長(zhǎng)因子、胰島素、促生長(zhǎng)激素）等。血清是細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中重要的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，同時(shí)也對(duì)細(xì)胞起到一定的保護(hù)作用。
血清中的沉淀是什么
用于細(xì)胞培養(yǎng)的各種血清產(chǎn)品（胎牛血清、新生牛血清和馬血清等）中都存在各種類(lèi)型的沉淀。除了膽固醇和一些蛋白沉淀之外，血清中也會(huì)含有纖維蛋白和磷酸鈣。雖然沉淀可引起初始問(wèn)題，但在細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)用方面，沉淀一般不會(huì)對(duì)血清的性能產(chǎn)生影響。
1. 纖維蛋白
肉眼可見(jiàn)的較大物質(zhì)（可達(dá) 1-2 mm）。血清是在低溫條件下收集并迅速加工處理，導(dǎo)致一些纖維蛋白原（纖維蛋白的前體）仍存在于溶液中。雖然過(guò)濾去除了絕大部分的纖維蛋白，但解凍過(guò)程中，纖維蛋白原會(huì)再次轉(zhuǎn)化成纖維蛋白析出，形成沉淀。
2. 磷酸鈣
一種常見(jiàn)的沉淀物，表現(xiàn)為云狀。通過(guò)倒置顯微鏡觀察，會(huì)發(fā)現(xiàn)許多小黑點(diǎn)。由于布朗運(yùn)動(dòng)，這些黑點(diǎn)可自由移動(dòng)，因此常備誤認(rèn)為是微生物污染。
少量的沉淀是血清解凍過(guò)程中的正?，F(xiàn)象，過(guò)于澄清的血清并不代表更高的品質(zhì)，也可能是「預(yù)老化」（加工過(guò)程中反復(fù)凍融盡可能的去除纖維蛋白原）的結(jié)果。雖然血清中的沉淀很難預(yù)測(cè)和阻止，但合理正確的儲(chǔ)存和使用方法可以降低血清中沉淀的析出，同時(shí)也可采取簡(jiǎn)單的方式去除沉淀物。
沉淀增多的原因
去除沉淀的方法
血清的解凍方法
1. 將凍存的血清移到 2-8℃ 的冰箱中，過(guò)夜處理；
2. 將血清移至 37℃ 水浴中，間歇性搖晃混勻底部的溶解物，直至全部溶解。
注意：
① 溫和的升溫過(guò)程可有效減少沉淀的產(chǎn)生，不推薦直接高溫解凍血清；
② 解凍之后的血清不要長(zhǎng)時(shí)間放置在 37℃ 下；
③ 若血清沒(méi)有混勻且放置于高于 40℃ 的水浴中，底部的蛋白會(huì)變性形成沉淀；
④ 在解凍過(guò)程中，需不斷的搖晃混合以阻止形成梯度及沉淀；
⑤ 在解凍或長(zhǎng)時(shí)間儲(chǔ)存之后，血清中會(huì)出現(xiàn)渾濁物和絮狀物；
⑥ 反復(fù)凍融會(huì)造成血清的沉淀增多，給后續(xù)處理帶來(lái)麻煩，我們建議血清的解凍/凍存次數(shù)越少越好。
血清的儲(chǔ)存方法及注意事項(xiàng)
關(guān)于 HyClone
HyClone 品牌誕生于 1967 年，總部位于美國(guó)猶他州洛根市，為生產(chǎn)血清而創(chuàng)立； | |
第一家在胎牛血清生產(chǎn)中引入完全真正混合技術(shù)的公司； | |
最早將心臟穿刺取血，三次 100 nm 過(guò)濾等技術(shù)應(yīng)用到血清的生產(chǎn)當(dāng)中，建立了血清生產(chǎn)行業(yè)的金標(biāo)準(zhǔn)； | |
2000 年 ATCC 對(duì) HyClone 血清實(shí)行免檢采購(gòu)； |
ISIA 協(xié)會(huì)會(huì)員。
HyClone 澳大利亞胎牛血清
源自澳大利亞，被 USDA 認(rèn)為無(wú)瘋牛病 (BSE) 和口蹄疫 (FMD)，原血采自非藍(lán)舌病疫區(qū)；
「真混合」 生產(chǎn)工藝，確保批內(nèi)一致性；
Oritain 指紋識(shí)別技術(shù)和完整的文件追蹤系統(tǒng)，確保來(lái)源可追溯性；
安全穩(wěn)定供貨；
通過(guò) USDA 安全測(cè)試；
依據(jù)美國(guó)聯(lián)邦法規(guī) 9 CFR 113.53 的病毒檢測(cè)；
低抗體含量，高生長(zhǎng)因子，未添加任何試劑。
產(chǎn)品列表
產(chǎn)品列表
澳大利亞優(yōu)級(jí)胎牛血清 | |
貨號(hào) | 包裝 |
SV30208.01 | 100 mL |
SV30208.02 | 500 mL |
